DIPLOCOCOS
Los diplococos son un
conjunto de bacterias que se caracterizan por ser cocos asociados
formando parejas. Entre los diplococos patógenos más característicos
encontramos a:
-Streptococcus pneumoniae : Neumococo o
diplococo Gram positivo.
[Streptococcus pneunoniae NO es
estrictamente un diplococo, es un coco en cadena que a veces se observa en
parejas. Actualmente está agrupado dentro de los streptococcus y, como tal, es
gran (+). Los diplococos, clásicamente, son todos gram (-)]
-Neisseria gonorrhoeae: Diplococo Gram negativo.
-Moraxella
catarrhalis: Diplococo Gram negativo.
-Neisseria meningitidis
ESPECIES PATOGENAS
Neisseria
Neisseria es un género de bacterias,
perteneciente a las proteobacterias, un gran grupo de bacterias Gram-negativas.
Las Neisseria son diplococos, que
asemejan o se iguala a granos de café al ser observados con el microscopio
óptico.1 El
género incluye las especiesNeisseria gonorrhoeae (llamada también gonococcus),
causante de la gonorrea, y Neisseria meningitidis (llamada
también meningococcus), una de las más comunes causas de meningitis bacteriana
y agente causal de sepsis meningocóccica.
El género Neisseria recibe su
nombre del bacteriólogo alemán Albert Neisser, que fue el primero en
describir Neisseria gonorrheae. Además, codescubrió el patógeno
causal de la lepra, Mycobacterium leprae. Estos estudios
fueron hechos posibles por el desarrollo de nuevas técnicas de tinción.
Los miembros del género Neisseria son bacterias en
forma de diplococos (crecen en pares), Gramnegativos, no esporulados
y solo N. gonorrhoeae y N. meningitidis presentan cápsula (de polisacaridos),
inmóviles, catalasa y oxidasa positivos. El tamaño promedio de la bacteria es
de 1µ de diámetro y sonaerobios estrictos.
En términos generales, este grupo de bacterias son
sensibles a los agentes fisicoquímicos como las altas temperaturas, la desecación y
los metales pesados entre otros.
PRUEBAS BIOQUIMICAS
AGAR MAC CONKEY
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram
negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite
diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua
y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en
el mismo.
Estafilococo
Patogeno: STAPHYLOCOCCUS AUREUS
El Staphylococcus aureus, conocido comúnmente como estafilococo áureo o dorado, es una bacteria anaerobia
facultativa grampositiva productora de coagulasa y catalasa que
se encuentra ampliamente distribuida por todo el mundo.
El S. aureus es un coco inmóvil, de 0.8 a 1 micrómetro de diámetro, que se divide en tres planos para formar grupos de células irregulares semejantes a racimos de uvas. En extendidos de pus los cocos aparecen solos, en pares, en racimos o en cadenas cortas. Los racimos irregulares son característicos de extendidos tomados de cultivos que se desarrollan en medios sólidos, mientras que en otros cultivos son frecuentes las formas de diplococos y en cadenas cortas. Unas pocas cepas producen una cápsula o capa de baba que incrementa la virulencia del microorganismo. El S. aureus es un microorganismo grampositivo pero las celulas viejas y los microorganismos fagocitados se tiñen como gramnegativos.
El S. aureus es un coco inmóvil, de 0.8 a 1 micrómetro de diámetro, que se divide en tres planos para formar grupos de células irregulares semejantes a racimos de uvas. En extendidos de pus los cocos aparecen solos, en pares, en racimos o en cadenas cortas. Los racimos irregulares son característicos de extendidos tomados de cultivos que se desarrollan en medios sólidos, mientras que en otros cultivos son frecuentes las formas de diplococos y en cadenas cortas. Unas pocas cepas producen una cápsula o capa de baba que incrementa la virulencia del microorganismo. El S. aureus es un microorganismo grampositivo pero las celulas viejas y los microorganismos fagocitados se tiñen como gramnegativos.
(Foto microscopica de Staphylococcus aureus con
tinción de Gram)
MEDIOS DIFERENCIALES DE CULTIVO
PRUEBAS BIOQUÍMICAS DIFERENCIALES
Prueba
del Manitol
Sirve para detectar si los gérmenes
son capaces de fermentar el manitol liberando productos ácidos que serán
detectados gracias al indicador rojo de fenol que cambiará a color amarillo.
Para esta prueba el medio manitol movilidad incluye 7,5 g/l de D-Manita.
Bacterias manitol (-) son, dentro de las enterobacterias,Proteus mirabilis, Proteus
vulgaris y Shigella dysenteriae. Entre las bacterias de
importancia clínica, la prueba del manitol sirve para diferenciar Staphylococcus aureus (+)
de Staphylococcus epidermidis (-).
Prueba de la Catalasa
Prueba de la Catalasa
Se utiliza para comprobar la
presencia del enzima catalasa que se encuentra el la mayoría de las bacterias
aerobias y anaerobias facultativas que contienen citocromo. La principal
excepción es Streptococcus.
Una prueba de rutina de la catalasa a
temperatura ambiente puede hacerse siguiendo dos técnicas:
- Método del portaobjetos
(recomendado):
- Con el asa de siembra recoger el centro de una colonia
pura de 18-24 horas y colocar sobre un portaobjetos limpio de vidrio.
- Agregar con gotero o pipeta Pasteur una gota de H2O2 al
30% sobre el microorganismo sin mezclarlo con el cultivo.
- Observar la formación inmediata de burbujas (resultado
positivo).
- Desechar el portaobjetos en un recipiente con
desinfectante.
- Si se invierte el orden del método (extender la colonia
sobre el agua oxigenada) pueden producirse falsos positivos.
- Método del tubo de ensayo:
- Agregar 1ml de H2O2 al 3%
directamente a un cultivo puro de agar en slant densamente inoculado.
- Observar la formación inmediata de burbujas (resultado
pos
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El neumococo, Streptococcus pneumoniae, es un microorganismo patógeno capaz de causar en humanos diversas infecciones y procesos invasivos severos. Se trata de una bacteria Gram positiva de 1,2-1,8 µm de longitud, que presenta una forma oval y el extremo distal lanceolado.
Generalmente, se presenta en forma de diplococo, por lo que inicialmente fue denominado Diplococcus pneumoniae, aunque existen algunos factores que pueden inducir la formación de cadenas.
El neumococo, Streptococcus pneumoniae, es un microorganismo patógeno capaz de causar en humanos diversas infecciones y procesos invasivos severos. Se trata de una bacteria Gram positiva de 1,2-1,8 µm de longitud, que presenta una forma oval y el extremo distal lanceolado.
Generalmente, se presenta en forma de diplococo, por lo que inicialmente fue denominado Diplococcus pneumoniae, aunque existen algunos factores que pueden inducir la formación de cadenas.
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Al microscopio optico se ven como cocos
gram positivas de aspecto lanceolado
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A pesar del nombre, este organismo
causa varios tipos de infección distintas a la Neumonia,incluyendo sinusitis, otitis
media, meningitis,osteomielitis, artritis séptica, endocarditis, peritonitis, pericarditis, celulitis,
y abscesos cerebrales.
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MEDIOS DIFERENCIALES DE CULTIVO
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Streptoccocus pneumoniae se aprecia
mejor en Agar Sangre de Cordero.
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PRUEBAS BIOQUÍMICAS DIFERENCIALES
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Dentro de las pruebas bioquímicas
para la identificación, la primera, luego de determinar
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que se trata de cocos Gram positivos,
es la prueba de la catalasa.
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Luego de determinar que se trata de
cocos Gram positivos, catalasa negativos, debemos
·
observar el efecto que producen las
colonias de la cepa en estudio sobre placas de agar sangre
·
ovina al 5% (tipo de hemólisis). Así
podemos clasificar este grupo de gérmenes en:
·
• beta-hemolíticos: son aquellos que
producen una hemólisis total de los glóbulos rojos,
·
observándose como un halo
transparente alrededor de las colonias.
·
• alfa-hemolíticos: son aquellos que
producen hemólisis parcial, la cual se observa como
·
un halo con tonalidad verdosa
alrededor de las colonias.
·
• gamma-hemolíticos: son aquellos que
no producen hemólisis sobre el agar sangre.
Estreptococo
patógeno: STREPTOCOCCUS PYOGENES
Streptococcus
pyogenes es una bacteria Gram-positiva que
crece en largas cadenas.1 S.
pyogenes muestra el Antígeno grupo A de la clasificación de Lancefield
en sus paredes celulares y hace hemólisis del tipo beta-hemólisis
cuando se cultiva en agar sangre. S. pyogenes típicamente
produce grandes zonas (halo) de beta-hemólisis, con completa rotura de eritrocitos y
la recuperación de hemoglobina Por todo ello se le conoce también por
estreptococo beta-hemolítico del grupo A(o sus siglas en inglés, GAS). Puede
ser encapsulado por lo que es resistente a la fagocitosis. Posee
numerosas exotoxinas. Se trata de un microorganismo no esporulado (no
produce esporas).
(Foto Microscopica de Streptococcus pyogenes con tinción de
gram)
MEDIOS DIFERENCIALES DE CULTIVO
(Agar Sangre con Hemolisis Beta de Streptococcus pyogenes)
Los aislamientos de S. Pyogenes son
cocos esféricos de 0,5 a 1,0 mm que forman cadenas cortas en las muestras
clínicas y cadenas mas largas cuando crecen en medio de cultivo. El crecimiento
es óptimo en un medio de agar sangre enriquecido, pero se inhibe si el medio
contiene una concentración elevada de glucosa. Después de 24 horas de
incubación se observan colonias blancas de 1 a 2 mm con grandes zonas de Beta
hemólisis.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS DIFERENCIALES
Dentro de las pruebas bioquímicas
para la identificación, la primera, luego de determinar
que se trata de cocos Gram positivos,
es la prueba de la catalasa.
Luego de determinar que se trata de
cocos Gram positivos, catalasa negativos, debemos
observar el efecto que producen las
colonias de la cepa en estudio sobre placas de agar sangre
ovina al 5% (tipo de hemólisis). Así
podemos clasificar este grupo de gérmenes en:
• beta-hemolíticos: son aquellos que
producen una hemólisis total de los glóbulos rojos,
observándose como un halo
transparente alrededor de las colonias.
• alfa-hemolíticos: son aquellos que
producen hemólisis parcial, la cual se observa como
un halo con tonalidad verdosa
alrededor de las colonias.
• gamma-hemolíticos: son aquellos que
no producen hemólisis sobre el agar sangre.